1. Purpose: Questa prucedura hà per scopu di furnisce una prucedura standardizata per l'operazioni asettiche è a prutezzione di stanze sterili.
2. Scopu di l'applicazione: laboratoriu di teste biologiche
3. Persona Responsable: Tester Supervisor QC
4.Definizione: Nimu
5. Precauzioni di sicurità
Eseguite strettamente operazioni asettiche per prevene a contaminazione microbiana; l'operatori deve spegne a lampada UV prima di entre in stanza sterile.
6.Procedures
6.1. A stanza sterile deve esse furnita cù una sala di operazione sterile è una stanza buffer. A limpezza di a sala di operazione sterile deve ghjunghje à a classa 10000. A temperatura di l'internu deve esse mantinutu à 20-24 ° C è l'umidità deve esse mantinuta à 45-60%. A pulizia di u bancu pulitu deve ghjunghje à a classe 100.
6.2. A stanza sterile deve esse mantenuta pulita, è hè strettamente pruibitu di pile up debris per prevene a contaminazione.
6.3. Prevene strettamente a contaminazione di tutti l'equipaggiu di sterilizazione è i medii di cultura. Quelli chì sò contaminati anu da cessà di aduprà.
6.4. A stanza sterile deve esse furnita cù disinfettanti di cuncentrazione di travagliu, cum'è suluzione 5% cresol, 70% alcolu, suluzione 0,1% chlormethionine, etc.
6.5. A stanza sterile deve esse sterilizzata regularmente è pulita cù un disinfettante appropritatu per assicurà chì a pulizia di a stanza sterile risponde à i requisiti.
6.6. Tutti i strumenti, strumenti, piatti è altri articuli chì deve esse purtatu in una stanza sterile deve esse imbulighjati è sterilizzati cù metudi appropritati.
6.7. Prima di entre in una stanza sterile, u persunale deve lavà e mani cù sapone o disinfettante, è poi cambià in vestiti di travagliu speciale, scarpi, cappelli, maschere è guanti in una stanza tampone (o asciugà e mani di novu cù 70% etanolu) prima di entre in una stanza sterile. Eseguite l'operazioni in a camera bacteriana.
6.8. Prima di utilizà a stanza sterile, a lampa ultravioletta in a stanza sterile deve esse attivata per l'irradiazione è l'sterilizazione per più di 30 minuti, è u bancu pulitu deve esse attivatu per u soffiu di l'aria à u stessu tempu. Dopu chì l'operazione hè finita, a stanza sterile deve esse pulita in u tempu è poi sterilizzata da a luce ultravioleta per 20 minuti.
6.9. Prima di l'ispezione, l'imballu esternu di a mostra di prova deve esse mantene intactu è ùn deve esse apertu per prevene a contaminazione. Prima di l'ispezione, aduprate boli di cuttuni 70% alcolu per disinfettà a superficia esterna.
6.10. Durante ogni operazione, un cuntrollu negativu deve esse fattu per verificà l'affidabilità di l'operazione aseptica.
6.11. Quandu si assorbe u liquidu bacteriale, duvete aduprà una bola d'aspirazione per assorbirlu. Ùn toccu a paglia direttamente cù a bocca.
6.12. L'agulla di inoculazione deve esse sterilizzata da a fiamma prima è dopu ogni usu. Dopu à rinfriscà, a cultura pò esse inoculata.
6.13. I cannucce, provette, petri dishes è altri utensili chì cuntenenu liquidu battìricu deve esse immersi in un bucket di sterilizazione chì cuntene 5% di suluzione Lysol per a disinfezione, è pigliate è lavate dopu à 24 ore.
6.14. Se ci hè un liquidu battìricu spulsatu nantu à a tavula o u pianu, duvete immediatamente versà a suluzione di l'acidu carbulicu 5% o 3% Lysol nantu à l'area contaminata per almenu 30 minuti prima di trattà. Quandu i vestiti di u travagliu è i cappelli sò contaminati da u fluidu battìricu, anu da esse eliminati immediatamente è lavati dopu à sterilizazione di vapore à alta pressione.
6.15. Tutti l'articuli chì cuntenenu battìri vivi devenu esse disinfettati prima di esse lavati sottu u rubinettu. Hè strettamente pruibitu di inquinare a fognaria.
6.16. U numaru di culunie in una stanza sterile deve esse verificatu ogni mese. Cù u bancu limpiu apertu, pigliate una quantità di petri sterili cù un diametru internu di 90 mm, è injectally aseptically circa 15 ml di nutriente agar culture medium chì hè stata fusa è rinfriscata à circa 45 ° C. Dopu a solidificazione, mette a testa in giù à 30 à 35 Incubate per 48 ore in un incubatore ℃. Dopu avè pruvucatu a sterilità, pigliate 3 à 5 platti è mette nantu à a manca, a mità è a diritta di a pusizione di travagliu. Dopu avè apertu a copertina è l'espone per 30 minuti, mette a testa in un incubatore da 30 à 35 ° C per 48 ore è caccià. esaminà. U numaru mediu di battìri varii nantu à a piastra in una zona pulita di classa 100 ùn deve esse più di 1 culunia, è u numeru mediu in una stanza pulita di classa 10000 ùn deve micca più di 3 culunie. Se u limitu hè superatu, a stanza sterile deve esse disinfettata accuratamente finu à chì l'ispezioni ripetute rispondenu à i requisiti.
7. Riferite à u capitulu (Metudu di Inspeczione di Sterilità) in "Metodi di Inspeczione Igienica di Drug" è "Pratiche Operative Standard Chine per Inspection Drug".
8. Dipartimentu di Distribuzione : Dipartimentu di Gestione di Qualità
Guida tecnica di stanza pulita:
Dopu avè ottene un ambiente sterile è materiali sterili, duvemu mantene un statu sterile per studià un microorganismu cunnisciutu specificu o aduprà e so funzioni. Altrimenti, diversi microorganismi da l'esternu ponu facilmente mischjà. U fenomenu di u mischju di microorganismi irrilevanti da l'esternu hè chjamatu bacteria contaminante in microbiologia. A prevenzione di a contaminazione hè una tecnica critica in u travagliu microbiologicu. A sterilizazione cumpleta da una banda è a prevenzione di a contaminazione da l'altru sò dui aspetti di a tecnica aseptica. Inoltre, duvemu impediscenu i microorganismi studiati, in particulare i microorganismi patogeni o microorganismi geneticamente ingegneri chì ùn esistenu micca in natura, da scappà da i nostri cuntenituri sperimentali in l'ambiente esternu. Per questi scopi, in microbiologia, ci sò parechje misure.
A stanza sterile hè generalmente una stanza chjuca apposta in u laboratoriu di microbiologia. Pò esse custruitu cù fogli è vetru. U spaziu ùn deve esse troppu grande, circa 4-5 metri quatratu, è l'altezza deve esse circa 2,5 metri. Una stanza buffer deve esse stallata fora di a stanza sterile. A porta di a stanza di buffer è a porta di a stanza sterile ùn deve micca affruntà a listessa direzzione per impediscenu chì u flussu di l'aire ùn porta in diversi batteri. Tant a stanza sterile è a stanza di buffer deve esse ermetica. L'equipaggiu di ventilazione interna deve avè dispositivi di filtrazione d'aria. U pianu è i mura di a stanza sterile deve esse liscia, difficiuli di portà a terra è faciule di pulisce. A superficia di u travagliu deve esse livellu. Sia a stanza sterile sia a stanza di buffer sò dotate di luci ultraviolette. I luci ultraviolet in una stanza sterile sò à 1 metru di distanza da a superficia di travagliu. U persunale chì entra in a stanza sterile deve portà vestiti è cappelli sterilizzati.
Attualmente, e stanze sterili sò soprattuttu in fabbriche di microbiologia, mentre chì i laboratorii generali utilizanu bancu puliti. A funzione principale di u bancu pulitu hè di utilizà un dispositivu di flussu d'aria laminare per caccià diverse polveri minuscule cumpresi i microorganismi nantu à a superficia di travagliu. U dispusitivu ilettricu permette aria à passà à traversu filtru hepa è poi entre superficia di travagliu, cusì chì a superficia di u travagliu hè sempre tenutu sottu à u cuntrollu di aria sterile flussu. Inoltre, ci hè una cortina d'aria d'alta veloce à u latu vicinu à l'esternu per impedisce l'entrata di l'aria bacteriana esterna.
In i lochi cù cundizioni difficiuli, i boxes sterili di lignu pò ancu esse usatu invece di bancu pulitu. A scatula sterile hà una struttura simplice è hè faciule di spustà. Ci sò dui buchi in u fronte di a scatula, chì sò bluccati da e porte push-pull quandu ùn sò micca in operazione. Pudete allargà i vostri braccia durante l'operazione. A parti suprana di u fronte hè dotata di vetru per facilità u funziunamentu internu. Ci hè una lampa ultravioletta in a scatula, è l'utensili è i batteri ponu esse messi in una piccula porta laterale.
I tecnichi operativi asettici attualmente ùn sò micca solu un rolu pivotale in a ricerca microbiologica è l'applicazioni, ma sò ancu largamente utilizati in parechje biotecnologii. Per esempiu, tecnulugia transgénica, tecnulugia di anticorpi monoclonali, etc.
Tempu di Postu: Mar-06-2024