1. Scopu: Questa prucedura hà per scopu di furnisce una prucedura standardizata per l'operazioni asettiche è a prutezzione di e camere sterili.
2. Campu d'applicazione: laburatoriu di analisi biologiche
3. Persona rispunsevule: Supervisore QC Tester
4. Definizione: Nisuna
5. Precauzioni di sicurezza
Eseguite operazioni strettamente asettiche per prevene a contaminazione microbica; l'operatori devenu spegne a lampada UV prima di entre in a stanza sterile.
6. Prucedure
6.1. A stanza sterile deve esse dotata di una sala operatoria sterile è di una sala tampone. A pulizia di a sala operatoria sterile deve ghjunghje à a classe 10000. A temperatura interna deve esse mantenuta à 20-24 °C è l'umidità deve esse mantenuta à 45-60%. A pulizia di u bancu pulitu deve ghjunghje à a classe 100.
6.2. A stanza sterile deve esse mantenuta pulita, è hè strettamente pruibitu d'accumulà detriti per impedisce a contaminazione.
6.3. Impedisce strettamente a contaminazione di tutti l'attrezzature di sterilizazione è di i mezi di cultura. Quelli chì sò contaminati devenu piantà di utilizalli.
6.4. A stanza sterile deve esse dotata di disinfettanti à cuncentrazione di travagliu, cum'è una soluzione di cresolu à 5%, alcolu à 70%, una soluzione di clormetionina à 0,1%, ecc.
6.5. A stanza sterile deve esse sterilizzata è pulita regularmente cù un disinfettante adattatu per assicurà chì a pulizia di a stanza sterile risponde à i requisiti.
6.6. Tutti i strumenti, strumenti, piatti è altri oggetti chì devenu esse purtati in una stanza sterile devenu esse imballati strettamente è sterilizzati cù metudi adatti.
6.7. Prima di entre in a stanza sterile, u persunale deve lavà si e mani cù sapone o disinfettante, è dopu cambià si in vestiti di travagliu speciali, scarpe, cappelli, maschere è guanti in a stanza tampone (o asciugà si di novu e mani cù etanolu à 70%) prima di entre in a stanza sterile. Eseguisce l'operazioni in a camera batterica.
6.8. Prima di utilizà una stanza sterile, a lampada ultravioletta in a stanza sterile deve esse accesa per l'irradiazione è a sterilizazione per più di 30 minuti, è u bancu pulitu deve esse accesu per u soffiu d'aria à u listessu tempu. Dopu chì l'operazione hè cumpletata, a stanza sterile deve esse pulita in tempu è poi sterilizzata cù luce ultravioletta per 20 minuti.
6.9. Prima di l'ispezione, l'imballu esternu di u campione di prova deve esse mantenutu intactu è ùn deve esse apertu per impedisce a contaminazione. Prima di l'ispezione, aduprate batuffoli di cuttone imbevuti di 70% d'alcol per disinfettà a superficia esterna.
6.10. Durante ogni operazione, un cuntrollu negativu deve esse effettuatu per verificà l'affidabilità di l'operazione asettica.
6.11. Quandu si assorbe un liquidu battericu, ci vole à aduprà una palla di aspirazione per assorbe lu. Ùn toccate micca a cannuccia direttamente cù a bocca.
6.12. L'agulla d'inoculazione deve esse sterilizzata à a fiamma prima è dopu ogni usu. Dopu u raffreddamentu, a cultura pò esse inoculata.
6.13. E cannucce, e provette, e piastre di Petri è altri utensili chì cuntenenu liquidu battericu devenu esse immersi in un secchiu di sterilizazione chì cuntene una soluzione Lysol à 5% per a disinfezione, è cacciati è sciacquati dopu à 24 ore.
6.14. S'ellu ci hè un liquidu battericu versatu nantu à a tavula o u pianu, duvete versà subitu una suluzione di 5% d'acidu carbolicu o 3% Lysol nantu à a zona contaminata per almenu 30 minuti prima di trattalla. Quandu i vestiti di travagliu è i cappelli sò contaminati da un fluidu battericu, devenu esse cacciati subitu è lavati dopu a sterilizazione à vapore à alta pressione.
6.15. Tutti l'articuli chì cuntenenu batteri vivi devenu esse disinfettati prima di esse sciacquati sottu à l'acqua corrente. Hè strettamente pruibitu di inquinà a fognatura.
6.16. U numeru di culonie in a stanza sterile deve esse verificatu mensilmente. Cù u bancu pulitu apertu, pigliate un certu numeru di piastre di Petri sterili cù un diametru internu di 90 mm, è iniettate asetticamente circa 15 ml di mezu di cultura agar nutritivu chì hè statu scioltu è raffreddato à circa 45 °C. Dopu a solidificazione, mette à capu in giù à 30 à 35 °C. Incubate per 48 ore in un incubatore ℃. Dopu avè pruvatu a sterilità, pigliate da 3 à 5 piastre è mette à manca, in mezu è à diritta di a pusizione di travagliu. Dopu avè apertu u coperchio è espostu per 30 minuti, mette à capu in giù in un incubatore da 30 à 35 °C per 48 ore è cacciatele. esaminate. U numeru mediu di batteri vari nantu à a piastra in una zona pulita di classe 100 ùn deve micca superà 1 culonia, è u numeru mediu in una stanza pulita di classe 10000 ùn deve micca superà 3 culonie. Se u limite hè superatu, a stanza sterile deve esse disinfettata accuratamente finu à chì ispezioni ripetute rispondenu à i requisiti.
7. Riferitevi à u capitulu (Metudu d'Ispezione di Sterilità) in "Metodi d'Ispezione Igienica di i Medicinali" è "Pratiche Operative Standard Cinesi per l'Ispezione di i Medicinali".
8. Dipartimentu di Distribuzione: Dipartimentu di Gestione di a Qualità
Guida tecnica per a stanza bianca:
Dopu avè ottenutu un ambiente sterile è materiali sterili, duvemu mantene un statu sterile per pudè studià un microorganismu specificu cunnisciutu o utilizà e so funzioni. Altrimenti, diversi microorganismi da fora ponu facilmente mischjà si. U fenomenu di a mistura di microorganismi irrilevanti da fora hè chjamatu batteri contaminanti in microbiologia. A prevenzione di a contaminazione hè una tecnica critica in u travagliu microbiologicu. A sterilizazione cumpleta da una parte è a prevenzione di a contaminazione da l'altra sò dui aspetti di a tecnica asettica. Inoltre, duvemu impedisce à i microorganismi in studiu, in particulare i microorganismi patogeni o i microorganismi geneticamente mudificati chì ùn esistenu micca in natura, di scappà da i nostri cuntenitori sperimentali in l'ambiente esternu. Per questi scopi, in microbiologia, ci sò parechje misure.
Una stanza sterile hè di solitu una piccula stanza apposta stallata in u laburatoriu di microbiologia. Pò esse custruita cù fogli è vetru. A zona ùn deve esse troppu grande, circa 4-5 metri quadrati, è l'altezza deve esse circa 2,5 metri. Una stanza tampone deve esse stallata fora di a stanza sterile. A porta di a stanza tampone è a porta di a stanza sterile ùn devenu micca esse orientate in a stessa direzzione per impedisce à u flussu d'aria di purtà batteri vari. Sia a stanza sterile sia a stanza tampone devenu esse ermetiche. L'equipaggiu di ventilazione interna deve avè dispositivi di filtrazione di l'aria. U pianu è i muri di a stanza sterile devenu esse lisci, difficiuli da cuntene sporcizia è faciuli da pulisce. A superficia di travagliu deve esse livellata. Sia a stanza sterile sia a stanza tampone sò dotate di luci ultraviolette. E luci ultraviolette in a stanza sterile sò à 1 metru di distanza da a superficia di travagliu. U persunale chì entra in a stanza sterile deve purtà vestiti è cappelli sterilizzati.
Attualmente, e camere sterili esistenu soprattuttu in e fabbriche di microbiologia, mentre chì i laboratori generali utilizanu banchi puliti. A funzione principale di u bancu puliti hè di utilizà un dispositivu di flussu d'aria laminare per rimuovere diverse piccule polveri, cumpresi i microorganismi, nantu à a superficia di travagliu. U dispositivu elettricu permette à l'aria di passà per u filtru hepa è poi entre in a superficia di travagliu, in modu chì a superficia di travagliu sia sempre tenuta sottu u cuntrollu di u flussu d'aria sterile. Inoltre, ci hè una cortina d'aria à alta velocità nantu à u latu vicinu à l'esternu per impedisce à l'aria batterica esterna di entre.
In i lochi cù cundizioni difficili, si ponu ancu aduprà scatule sterili di legnu invece di u bancu pulitu. A scatula sterile hà una struttura simplice è hè faciule da spustà. Ci sò dui fori nantu à a parte anteriore di a scatula, chì sò bluccati da porte push-pull quandu ùn sò micca in funzione. Pudete stende e braccia durante l'operazione. A parte superiore di a parte anteriore hè dotata di vetru per facilità l'operazione interna. Ci hè una lampada ultravioletta in a scatula, è l'utensili è i batteri ponu esse messi per mezu di una piccula porta da u latu.
E tecniche operative asettiche ùn ghjocanu micca solu un rollu fundamentale in a ricerca è l'applicazioni microbiologiche, ma sò ancu largamente aduprate in parechje biotecnologie. Per esempiu, a tecnulugia transgenica, a tecnulugia di l'anticorpi monoclonali, ecc.
Data di publicazione: 06-03-2024