1. Purpose: Questa prucedura hà per scopu di furnisce una prucedura standardizata per l'operazioni asettiche è a prutezzione di stanze sterili.
2. Scopu di l'applicazione: laboratoriu di teste biologiche
3. Persona Responsable: Tester Supervisor QC
4.Definition : Nimu
5. Precauzioni di sicurità
Eseguite strettamente operazioni asettiche per prevene a contaminazione microbica;l'operatori deve spegne a lampada UV prima di entre in stanza sterile.
6.Procedures
6.1.A stanza sterile deve esse furnita cù una sala di operazione sterile è una stanza buffer.A limpezza di a sala di operazione sterile deve ghjunghje à a classa 10000. A temperatura di l'internu deve esse mantinutu à 20-24 ° C è l'umidità deve esse mantinuta à 45-60%.A pulizia di u bancu pulitu deve ghjunghje à a classe 100.
6.2.A stanza sterile deve esse mantenuta pulita, è hè strettamente pruibitu di pile up debris per prevene a contaminazione.
6.3.Prevene strettamente a contaminazione di tutti l'equipaggiu di sterilizazione è i medii di cultura.Quelli chì sò contaminati anu da cessà di aduprà.
6.4.A stanza sterile deve esse furnita cù disinfettanti di cuncentrazione di travagliu, cum'è suluzione 5% cresol, 70% alcolu, suluzione 0,1% chlormethionine, etc.
6.5.A stanza sterile deve esse sterilizzata regularmente è pulita cù un disinfettante appropritatu per assicurà chì a pulizia di a stanza sterile risponde à i requisiti.
6.6.Tutti i strumenti, strumenti, piatti è altri articuli chì deve esse purtatu in a stanza sterile deve esse imbulighjati è sterilizzati cù metudi appropritati.
6.7.Prima di entre in una stanza sterile, u persunale deve lavà e mani cù sapone o disinfettante, è poi cambià in vestiti di travagliu speciale, scarpi, cappelli, maschere è guanti in una stanza tampone (o asciugà e mani di novu cù 70% etanolu) prima di entre in una stanza sterile.Eseguite l'operazioni in a camera bacteriana.
6.8.Prima di utilizà a stanza sterile, a lampa ultravioletta in a stanza sterile deve esse attivata per l'irradiazione è l'sterilizazione per più di 30 minuti, è u bancu pulitu deve esse attivatu per u soffiu di l'aria à u stessu tempu.Dopu chì l'operazione hè finita, a stanza sterile deve esse pulita in u tempu è poi sterilizzata da a luce ultravioleta per 20 minuti.
6.9.Prima di l'ispezione, l'imballu esternu di a mostra di prova deve esse mantene intactu è ùn deve esse apertu per prevene a contaminazione.Prima di l'ispezione, aduprate boli di cuttuni 70% alcolu per disinfettà a superficia esterna.
6.10.Durante ogni operazione, un cuntrollu negativu deve esse fattu per verificà l'affidabilità di l'operazione aseptica.
6.11.Quandu si assorbe u liquidu bacteriale, duvete aduprà una bola d'aspirazione per assorbirlu.Ùn toccu a paglia direttamente cù a bocca.
6.12.L'agulla di inoculazione deve esse sterilizzata da a fiamma prima è dopu ogni usu.Dopu à rinfriscà, a cultura pò esse inoculata.
6.13.I cannucce, provette, petri dishes è altri utensili chì cuntenenu liquidu battìricu deve esse immersi in un bucket di sterilizazione chì cuntene 5% di suluzione Lysol per a disinfezione, è pigliate è lavate dopu à 24 ore.
6.14.Se ci hè un liquidu battìricu spulsatu nantu à a tavula o u pianu, duvete immediatamente versà a suluzione di l'acidu carbulicu 5% o 3% Lysol nantu à l'area contaminata per almenu 30 minuti prima di trattà.Quandu i vestiti di u travagliu è i cappelli sò contaminati da u fluidu battìricu, anu da esse eliminati immediatamente è lavati dopu à sterilizazione di vapore à alta pressione.
6.15.Tutti l'articuli chì cuntenenu battìri vivi devenu esse disinfettati prima di esse lavati sottu u rubinettu.Hè strettamente pruibitu di inquinare a fognaria.
6.16.U numaru di culunie in una stanza sterile deve esse verificatu ogni mese.Cù u bancu limpiu apertu, pigliate una quantità di petri sterili cù un diametru internu di 90 mm, è injectally aseptically circa 15 ml di nutriente agar culture medium chì hè stata fusa è rinfriscata à circa 45 ° C.Dopu a solidificazione, mette a testa in giru à 30 à 35 Incubate per 48 ore in un incubatore ℃.Dopu avè pruvucatu a sterilità, pigliate 3 à 5 platti è mette nantu à a manca, a mità è a diritta di a pusizione di travagliu.Dopu avè apertu u coperchiu è l'espone per 30 minuti, mette a testa in un incubatore da 30 à 35 ° C per 48 ore è caccià.esaminà.U numaru mediu di battìri varii nantu à a piastra in una zona pulita di classa 100 ùn deve micca più di 1 culunia, è u numeru mediu in una stanza pulita di classe 10000 ùn deve micca più di 3 culonii.Se u limitu hè superatu, a stanza sterile deve esse disinfettata accuratamente finu à chì l'ispezioni ripetute rispondenu à i requisiti.
7. Riferite à u capitulu (Metudu di Inspeczione di Sterilità) in "Metodi di Inspeczione Igienica di Drug" è "Pratiche Operative Standard Chine per Inspection Drug".
8. Dipartimentu di Distribuzione : Dipartimentu di Gestione di Qualità
Guida tecnica di stanza pulita:
Dopu avè ottene un ambiente sterile è materiali sterili, duvemu mantene un statu sterile per studià un microorganismu cunnisciutu specificu o aduprà e so funzioni.Altrimenti, diversi microorganismi da l'esternu ponu facilmente mischjà. U fenomenu di u mischju di microorganismi irrilevanti da l'esternu hè chjamatu bacteria contaminante in microbiologia.A prevenzione di a contaminazione hè una tecnica critica in u travagliu microbiologicu.A sterilizazione cumpleta da una banda è a prevenzione di a contaminazione da l'altru sò dui aspetti di a tecnica aseptica.Inoltre, duvemu impediscenu i microorganismi studiati, in particulare i microorganismi patogeni o microorganismi geneticamente ingegneri chì ùn esistenu micca in natura, da scappà da i nostri cuntenituri sperimentali in l'ambiente esternu.Per questi scopi, in microbiologia, ci sò parechje misure.
A stanza sterile hè generalmente una stanza chjuca apposta in u laboratoriu di microbiologia.Pò esse custruitu cù fogli è vetru.U spaziu ùn deve esse troppu grande, circa 4-5 metri quatratu, è l'altezza deve esse circa 2,5 metri.Una stanza buffer deve esse stallata fora di a stanza sterile.A porta di a stanza di buffer è a porta di a stanza sterile ùn deve micca affruntà a listessa direzzione per impediscenu u flussu di l'aire da purtà in diversi batteri.Tant a stanza sterile è a stanza di buffer deve esse ermetica.L'equipaggiu di ventilazione interna deve avè dispositivi di filtrazione d'aria.U pianu è i mura di a stanza sterile deve esse liscia, difficiuli di portà a terra è faciule di pulisce.A superficia di u travagliu deve esse livellu.Sia a stanza sterile sia a stanza di buffer sò dotate di luci ultraviolette.I luci ultraviolet in una stanza sterile sò à 1 metru di distanza da a superficia di travagliu.U persunale chì entra in a stanza sterile deve portà vestiti è cappelli sterilizzati.
Attualmente, stanze sterili sò soprattuttu in fabbriche di microbiologia, mentre chì i laboratorii generali utilizanu bancu puliti.A funzione principale di u bancu pulitu hè di utilizà un dispositivu di flussu d'aria laminare per sguassà diverse polveri minuscule cumpresi i microorganismi nantu à a superficia di travagliu.U dispusitivu ilettricu permette aria à passà à traversu filtru hepa è poi entre superficia di u travagliu, tantu chì a superficia di u travagliu hè sempre tenutu sottu à u cuntrollu di l 'aria sterile flussu.Inoltre, ci hè una cortina d'aria d'alta veloce à u latu vicinu à l'esternu per impedisce l'ingressu di l'aria bacteriana esterna.
In i lochi cù cundizioni difficiuli, i boxes sterili di lignu pò ancu esse usatu invece di bancu pulitu.A scatula sterile hà una struttura simplice è hè faciule di spustà.Ci sò dui buchi in u fronte di a scatula, chì sò bluccati da e porte push-pull quandu ùn sò micca in operazione.Pudete allargà i vostri braccia durante l'operazione.A parti suprana di u fronte hè dotata di vetru per facilità u funziunamentu internu.Ci hè una lampa ultravioletta in a scatula, è l'utensili è i batteri ponu esse messi in una piccula porta laterale.
I tecnichi operativi asettici attualmente ùn sò micca solu un rolu pivotale in a ricerca microbiologica è l'applicazioni, ma sò ancu largamente utilizati in parechje biotecnologii.Per esempiu, tecnulugia transgénica, tecnulugia di anticorpi monoclonali, etc.
Tempu di Postu: Mar-06-2024